以下是三角振荡培养瓶操作规范中，从棉塞选择到取样、避免污染的十个关键细节：
棉塞选择与制作：使用一级或二级未脱脂、质量好的棉花，棉塞与瓶口壁需密合，防止空气中的微生物进入。棉塞大小根据容器而定，不过紧或过松，插入深度保持2.5-3.5cm，确保既不易脱落又能有效通气。
灭菌处理：棉塞需采用干热灭菌法（145-160℃，1-2小时）进行灭菌，灭菌后待温度降至80℃以下再取出，避免外界微生物污染。
培养瓶清洗与消毒：使用温水和中性洗涤剂清洗培养瓶，去除表面污垢和残留物，再用70%乙醇或其他适当消毒剂消毒，确保无菌环境。
检查培养瓶完整性：使用前仔细检查瓶身、瓶盖和密封性，确保无破损或漏液，防止细胞培养过程中受到不良影响。
无菌操作环境：在超净工作台内进行所有操作，确保无菌环境，减少污染风险。
培养液与细胞准备：根据实验需求选择合适的培养液，确保能够提供细胞所需的营养和环境条件。细胞培养需按照标准技术进行，包括复苏、传代和扩增等步骤。
培养条件设置：将培养瓶置于恒温摇床或培养箱中，设置适当的温度和湿度条件，以及摇瓶转速和振幅，避免剧烈摇晃影响细胞生长。
定期观察与记录：定期在显微镜下观察细胞生长情况，包括细胞形态、生长密度和有无污染等，并记录相关数据，以便及时发现并处理异常情况。
规范取样操作：取样时需遵循无菌操作原则，避免交叉污染。取样前需对取样工具进行灭菌处理，取样过程中需保持手部清洁，避免直接接触样品。
及时清洁与维护：实验结束后，及时清洁培养瓶和实验设备，定期维护振荡摇床或培养箱，确保其正常运行和延长使用寿命。
